Utilización de Southern Blot para el diagnóstico de la hepatitis B (VHB)

Objetivo: Analizar los niveles de expresión de HAT1 en el hígado de personas infectadas con (VHB).
Técnica de Southern Blot
Muestra: Tejidos hepáticos no tumorales en pacientes con carcinoma hepatocelular (HCC)
Tipo de Ácido Nucleico: ARN
Extracción de ARN: El ARN se extrajo del tejido utilizando el reactivo Trizol y con el mismo reactivo se sintetizo la primera cadena de ADNc
Aislamiento cccDNA del VHB: La extracción selectiva de cccDNA del VHB de las células se logro con la utilización del kit SYBR Green Premix. 
Transferencia a Southern Blot del cccDNA de HBV: La muestra de cccDNA del VHB se sometió a electroforesis en gel de agarosa y se transfirió a una membrana Amersham Hybond-N+, seguido de sondeo con "DIG-labeled probes of linear HBx DNA fragments.
Visualización: Autoradiografía de hibridación.
Usos: Determinar la presencia de un gen o fragmentos del ADN específicos en una mezcla de ácidos nucleicos,  identificar genes asociados con enfermedades , e identificar mutaciones, deleciones y dosis génica en caso de ser portadores

Referencia:

Yang G, Feng J, Liu Y, Zhao H, Ying Y, Hongfeng Y, Yun H, Mingming S, Bu Y, Liu L, Liu Z. La señalización de HAT1 confiere ensamblaje y regulación epigenética del microcromosoma ccDNA del VHB. (Internet) 2019. (citado el 08 de enero del 2023). Disponible en: https://uceedu-my.sharepoint.com/personal/jtcaizad_uce_edu_ec/_layouts/15/onedrive.aspx?id=%2Fpersonal%2Fjtcaizad%5Fuce%5Fedu%5Fec%2FDocuments%2Fyang2019%2Ezh%2DCN%2Ees%2Epdf&parent=%2Fpersonal%2Fjtcaizad%5Fuce%5Fedu%5Fec%2FDocuments